SETOR ECONÔMICO:

Biotecnologia

PROBLEMA QUE SOLUCIONA:

O estabelecimento de novas metodologias para o estudo sorológico da infecção pelo T. cruzi revela-se como uma necessidade real e urgente. A presente tecnologia propõe o emprego de uma nova técnica FC-TRIPLEX Chagas/Leish IgG1, de fácil execução e baixo custo, para o diagnóstico sorológico da doença de Chagas, com o objetivo de solucionar os resultados inconclusivos, problema frequente durante o diagnóstico da doença de Chagas.

SOLUÇÃO APRESENTADA:

Trata-se de um método para diagnóstico diferencial de doença de chagas, leishmaniose tegumentar e leishmaniose visceral utilizando reação de imunofluorescência por citometria de fluxo. O método diagnóstico utiliza a marcação fluorescente diferencial dos parasitos causadores das doenças e emprega a pesquisa simultânea de anticorpos IgG1 anti-formas específicas de epimastigotas de T. cruzi e promastigotas de L. infantum e L. braziliensis. A metodologia FC-TRIPLEX Chagas/Leish IgG1 tem sido aplicada em uma coorte de indivíduos chagásicos e não infectados, e fornecidoresultados promissores no que se refere à sensibilidade e especificidade, diminuindo substancialmente o número de resultados falso-positivos e falso-negativos em comparação com outras metodologias disponíveis. Nesse sentido, propõe-se a análise da reatividade de IgG1 por esta metodologia, tendo uma importante aplicabilidade em hemocentros como uma técnica confirmatória para o esclarecimento das situações diagnósticas não-negativas (inconclusivas) e indeterminadas (zona cinza) para doença de Chagas, que constituem uma realidade dispendiosa.

PRINCIPAIS VANTAGENS E BENEFÍCIOS:

Este método será um meio alternativo e inédito de diagnóstico diferencial da Doença de Chagas, Leishmaniose Tegumentar e Leishmaniose Visceral. Diferentemente de outros métodos sorológicos convencionais de diagnóstico (ELISA, RIFI e HAI), para tais infecções, a metodologia proposta aqui utiliza a citometria de fluxo como ferramenta para detecção de anticorpos anti-Tripanosomatídeos no soro sanguíneo dos pacientes. Cabe ressaltar que os métodos que empregam reações de imunofluorescência apresentam vantagens em relação aos métodos enzimático-colorimétricos, uma vez que permitem a análise semi-quantitativa mais segura da reatividade sorológica e sofrem menos influência de variáveis. Além disso, a demanda para um kit para o diagnóstico sorológico diferencial da doença de Chagas e leishmanioses que permita diagnóstico especifico é real. 

A presente tecnologia trata-se de um método de execução simples, rápido, de boa reprodutibilidade, isento de variabilidades metodológicas inerentes ao analista, com sensibilidade superior aos diferentes protocolos de detecção e revelação convencionais e sem risco para o paciente. A utilização da citometria de fluxo em ensaios sorológicos na rotina de um laboratório clínico, no que se refere ao gasto de reagentes, mostra que a possibilidade de se trabalhar com microtécnicas, permite que a metodologia seja desenvolvida minimizando o uso de grandes volumes de regentes, consequentemente favorecendo um menor custo final do teste.

POTENCIAIS E APLICAÇÕES:

A demanda de um método capaz de proporcionar o diagnóstico sorológico diferencial da doença de Chagas e leishmanioses é evidente, não apenas no esclarecimento diagnóstico em situações de sorologia não negativa para doença de Chagas em triagem para banco de sangue e em serviços de referência, como também na real expectativa que a inserção de triagem sorológica para leishmanioses em banco de sangue e tecidos possui no mundo atual. São diversos os estudos que sugerem a possibilidade de transmissão de leishmaniose visceral por transfusão sanguínea e transplante de órgão, sem, no entanto, existir um método sorológico capaz de realizar em plataforma única o diagnóstico diferencial das leishmanioses e da doença de Chagas. Esse problema assume proporções ainda maiores quando projetado na realidade de regiões co-endêmicas para essas patologias, que vem alcançando dimensões globais em decorrência dos processos de migração populacional e mudanças ambientais. Atualmente, no Brasil, a grande maioria das instituições de pesquisa elaboratórios de referência em saúde pública possui infraestrutura necessária para a execução do teste sorológico TRIPLEX. Existe ainda a perspectiva atual de que o teste sorológico TRIPLEX seja um protótipo para a incorporação de inovações complementares, assumindo uma modalidade Multiplex, incorporando o diagnóstico de outras doenças infecto-parasitárias. Ademais, a ampliação do uso da citometria de fluxo permitirá, num futuro próximo, a implementação de novas metodologias em laboratórios convencionais, favorecendo maior intercâmbio entre os centros de pesquisa de desenvolvimento tecnológico e a rotina de um laboratório clínico. Do ponto de vista individual, alguns pacientes que são encaminhados para centros mais especializados já poderiam ser beneficiados em laboratórios de referência. Em áreas endêmicas, poderia ser feita a coleta do soro do paciente e posteriormente encaminhado a um laboratório de referência.

ESTÁGIO DE DESENVOLVIMENTO:

Protótipo.

TITULARES:

FUNDAÇÃO OSWALDO CRUZ MINAS (FIOCRUZ - MG)

FUNDAÇÃO HEMOMINAS (HEMOMINAS)

FUNDAÇÃO PRÓ-SANGUE

UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPÍRITO SANTO (UFES)

NÚMERO DO PROCESSO DO INPI:

BR10 2012 005567 8

INFORMAÇÕES PARA CONTATO:

COORDENAÇÃO DO NIT FIOCRUZ - MG: ana.granato@fiocruz.br 

LINKS ÚTEIS:

Acesse o pedido de patente de invenção na íntegra aqui.